本項目針對沈陽某乳業(yè)公司7個奶牛場的3 000多頭成母牛進行血液生化指標抽查，目的在于了解該公司牛群血中鈣、磷和β-胡蘿卜素的盈缺狀況，以及與酮病相關(guān)的營養(yǎng)代謝病的發(fā)病情況、發(fā)病規(guī)律，為早期預防、治療酮病和合理飼養(yǎng)管理提供科學依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 實驗時間及血樣來源 本次實驗于2003年2月21日至4月22日期間分３個階段進行。第１階段測定84頭奶牛；第２階段測定84頭奶牛；第３階段測定85頭奶牛，共253頭奶牛。采樣牛分別來自該公司的７個奶牛場。將每個奶牛場的成年牛分為高產(chǎn)牛、產(chǎn)后牛和干奶牛３種類型，其中高產(chǎn)牛為日產(chǎn)奶量在25 kg以上的牛，產(chǎn)后牛為產(chǎn)后15天以內(nèi)的牛。每次采樣都是從3種類型牛中隨機抽取采樣牛，并記錄采樣牛的具體情況和資料。采樣工作于早晨7點開始，頸靜脈采血10ml，肝素鈉抗凝，3 000r/min離心10min，血漿分裝于小塑料管中封口后置冰盒內(nèi)送實驗室待測。未測完的血樣，置冰箱4℃保存。
1.2 檢測內(nèi)容 血漿中鈣的測定（甲基麝香草酚藍比色法）；血漿中無機磷的測定（硫酸亞鐵磷鉬藍比色法）；血漿中β-胡蘿卜素的測定（比色法）；血漿中酮體的檢測（快速檢測法）；血糖的檢測（鄰甲苯胺法），血糖含量從第二階段開始測定；血漿中谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）的檢測（賴氏2,4-二硝基苯肼法）；血漿中CO2結(jié)合力的檢測（酸堿滴定法）。
1.3 正常參考值
健康成年奶牛(產(chǎn)奶期)血中正常參考值為：鈣2.25~2.75 mmol/L；磷1.39~2.77mmol/L；β-胡蘿卜素540~1 340μg/100ml，平均值770μg/100ml；血中酮體含量在10mg/dl以下；血糖62～68.04 mg/dl，平均值65.02 mg/dl；CO2結(jié)合力28～34 mmol/L，平均值31 mmol/L；GPT 5～27卡門單位。
2 結(jié)果與分析
2.1 受試牛血中鈣、磷的檢測結(jié)果 見表1和表2。(略)
全群牛血中鈣、磷含量都較正常值偏低，特別是磷的含量更低。血鈣的最高值和最低值分別為3.32 mmol/L和1.53 mmol/L，平均值為2.28±0.46 mmol/L；血磷的最高值和最低值分別為2.71 mmol/L和0.84 mmol/L，平均值為1.72±0.42mmol/L。血中鈣、磷［血鈣（mg/dl）∶血磷（mg/dl）］比例不當，超過正常水平要求的1.5∶1.0以上，平均為1.73∶1.0，最大值為3.96∶1.0，最小值為0.645∶1.0（即磷的含量比鈣高，有的血磷含量是血鈣含量的兩倍）。血中鈣、磷含量乘積［血鈣（mg/dl）×血磷（mg/dl）］偏低，平均值為46.95，最高值為63.74，最低值為24.50。高產(chǎn)奶牛血中鈣、磷水平相對其他類型牛較高，但血鈣仍較正常值偏低。產(chǎn)后牛血中鈣、磷是所測類型牛中最低的，尤以渾河牛場最明顯，血鈣平均值為1.78mmol/L, 血磷平均值為1.72mmol/L。產(chǎn)后牛中有53%的牛有病，以食欲不佳和胎衣不下者居多。奶牛血中鈣、磷含量均較低，與日糧中鈣磷含量不足、日糧中鈣磷比例不合理、瘤網(wǎng)胃代謝功能紊亂、奶牛自身機體機能狀態(tài)不佳等均有關(guān)。
2.2 受試牛血中β-胡蘿卜素的檢測結(jié)果 見表1和表2。
血中β-胡蘿卜素含量在各奶牛場之間差異較大，最高值為657μg/dl, 最低值為52μg/dl，平均值為292.11±175.34μg/dl，與正常值相比差異較大，低于微量（低于100μg/dl即屬微量）的有13頭次。高產(chǎn)牛血中β-胡蘿卜素含量相對較高，明顯高于其他類型的牛，平均值為378.46±145μg/dl，其中含量相對較高的是三洼奶牛場，其高產(chǎn)奶牛血中β-胡蘿卜素含量平均為473.38μg/dl，而最高值657μg/dl 就是由三洼奶牛場的5849號牛創(chuàng)造。同樣該公司所屬奶牛場中產(chǎn)奶量最高的也是三洼奶牛場，這也說明血中β-胡蘿卜素含量高低與產(chǎn)奶量呈正相關(guān)。產(chǎn)后牛血中β-胡蘿卜素含量是所測類型牛中最低的，尤以渾河牛場最明顯，其產(chǎn)后牛血中β-胡蘿卜素的平均值為131.50μg /dl。本次檢測結(jié)果說明該公司牛群日糧中青綠多汁飼料不足。
2.3 奶牛血中酮體的檢測結(jié)果 見表3。
共有45頭被檢出血中酮體陽性，總陽性率為17.78%（45/253），其中第1階段測定時的陽性率為最高，第2階段次之，第3階段為最低。不同階段發(fā)病率的降低可能與飼料和飼養(yǎng)管理的逐步改善有關(guān)。在45頭酮體陽性牛中，酮體含量為10~20 mg/dl的占40.00%（18/45）；含量為20～30mg/dl的占42.22%（19/45）；含量為30～40mg/dl的占11.11%（5/45）；含量為40～50mg/dl的占6.67%（3/45）。在各類型牛中，陽性率最低的是干奶牛，而產(chǎn)后牛的發(fā)病率最高，為39.13%(36/92)，這符合酮病多發(fā)于奶牛產(chǎn)后第一個泌乳月的規(guī)律。此外，在45頭酮體陽性牛中，初產(chǎn)牛的陽性率為40.00% (18/45)，二產(chǎn)牛的陽性率為33.33%（15/45）, 三產(chǎn)牛為15.56%(7/45),四產(chǎn)牛為6.67% (3/45),五產(chǎn)牛為4.44%(2/45), 五胎以上的為2.22%(1/45)。本次測定以初產(chǎn)牛的陽性率為最高，這與其他報道有一定的差異，但類似現(xiàn)象在生產(chǎn)中并不少見，具體原因有待繼續(xù)探討，可能與該公司育成牛的飼養(yǎng)不當有關(guān)。
所有奶牛場都有酮病發(fā)生，有的牛場陽性率還較高，每個牛場都以產(chǎn)后牛陽性率較高，其次是高產(chǎn)牛。這說明該公司的牛群在圍產(chǎn)期階段飼養(yǎng)管理方面存在的問題較大。
2.4 血糖的檢測結(jié)果 從表1和表2可見，本次測定所得數(shù)值較健康奶牛的正常值均偏低，說明奶牛整體的營養(yǎng)狀況不太好。其中干奶牛測定值最高，而產(chǎn)后牛數(shù)值最低。高產(chǎn)牛因產(chǎn)乳量大，糖的消耗量也大，所以血糖含量較低。產(chǎn)后牛血糖含量普遍偏低，這與所有牛場都存在產(chǎn)后牛酮體陽性率較高相適應，并且每個奶牛場都有個別牛產(chǎn)后出現(xiàn)血糖含量極低的現(xiàn)象。奶牛產(chǎn)后血糖濃度降低可見于產(chǎn)后分娩應激性厭食、瘤網(wǎng)胃消化功能紊亂、脂肪肝和酮病等。
2.5 血中CO2結(jié)合力的檢測結(jié)果 見表1和表2。產(chǎn)后牛都存在酸中毒的可能，高產(chǎn)牛也一樣。第１階段時，共有25頭奶牛的測定值低于正常值，占29.26%；第２階段共60頭奶牛的測定值低于正常值，占71.43%；第３階段更低，測定值低于正常值的有75頭，占88.23%。說明代謝性酸中毒問題嚴重，發(fā)病率高。三個階段發(fā)病率的逐漸增加可能與天氣變熱有關(guān)。
在各類型奶牛中，以高產(chǎn)牛問題最嚴重，平均測定值最低，低值奶牛占高產(chǎn)?？倲?shù)的82.8%，說明高產(chǎn)牛采食精料量較大，導致瘤胃內(nèi)酸度增加，所以更易發(fā)生代謝性酸中毒。
2.6 血中GPT的檢測結(jié)果 見表1和表2。除第２階段測定結(jié)果的平均值低于正常值外，第３階段略偏高，第一階段較高，總平均值也高于正常值。在不同類型的奶牛中，以高產(chǎn)牛血中GPT的平均含量最高，其中GPT高于正常的牛占高產(chǎn)牛總數(shù)的72.86%；而干奶牛的平均含量相對較低，但GPT高于正常的占47.89%。
所測奶牛血中GPT普遍較高，說明該公司牛群除了酮病或脂肪肝的發(fā)病率較高外，還存在某些原因引起肝臟慢性中毒的可能，導致整個牛群的肝功能普遍較差。奶牛血中GPT超標的原因很多，而且各牛場情況可能有所不同，不能輕易下結(jié)論，還需進一步探討。可能的原因有如下幾種：產(chǎn)前飼養(yǎng)失宜，干奶期過肥等原因?qū)е碌漠a(chǎn)后脂肪肝或酮??；由于精料量過多、酒糟喂量大或酸敗等原因引起的瘤胃酸中毒而導致的肝膿腫；預混料中某些微量元素或維生素超標而導致的肝臟慢性中毒；飼料中某些原料（如棉籽餅等）被霉菌污染而導致的肝臟慢性中毒；環(huán)境中某些常量或微量元素超標（如水或牧草中高氟或高硒等）引起的肝臟慢性中毒等。
３ 小結(jié)
全群牛血中鈣、磷含量的平均值偏低，其中產(chǎn)后奶牛血中鈣、磷水平更低；血中鈣、磷比例不當；血中鈣、磷含量乘積偏低，牛體內(nèi)鈣、磷總量不足。全群牛血中β胡蘿卜素含量嚴重不足，但高產(chǎn)奶牛血中含量相對較高。全群牛中產(chǎn)后牛的酮體陽性率最高，并且初產(chǎn)牛和二產(chǎn)牛陽性率較高。全群牛血糖含量的平均值為58.56±21.35mg/dl，其中干奶牛測定值較高，高產(chǎn)牛血糖含量較低，產(chǎn)后牛最低。
全群牛血中CO2結(jié)合力的平均值為26.83±6.31 mmol/L，高產(chǎn)牛血中CO2結(jié)合力較低。
全群牛血中GPT含量的平均值為29.27±16.14卡門單位，其中高產(chǎn)牛血中GPT的平均含量最高，而干奶牛的平均含量相對較低。
該公司牛群在圍產(chǎn)期階段存在較大的飼養(yǎng)和管理問題。